常规的硅胶基质色谱柱不能耐受高PH,可以选择杂化硅胶颗粒或者聚合物基质的色谱柱,多点键和的色谱柱在高PH下也会比单点键和的色谱柱寿命更长。
1、拿到色谱柱后先阅读说明书,了解色谱柱的具体性能:耐受温度、耐受PH等。以及色谱柱的冲洗和保存条件。经过柱校测试确认色谱柱本身没有问题后方可正常使用。
2、样品充分前处理,确保样品的洁净;使用保护柱或在线过滤器,根据实际情况更换保护柱芯或滤片。
3、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
4、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐,避免出现盐析。
5、选择使用适宜的流动相(尤其是PH),以避免固定相被破坏,PH过低共价键断裂,键和相水解;PH过高硅胶溶解。
6、色谱柱使用过程中,如果压力升高,或出现污染,选择适当的条件冲洗或反冲。
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